Blood Smear Slide Staining कैसे करते हैं - Field Stain

Field Staining :

Field stain  thick film staining  करने  में  प्रायः  use  किया जाता है | मलेरिया  और  अन्य  पैरासाइट्स  के  लिए  thick film  को  field stain  से  staining  करते  है  |

Field Stain:

Using Commercially Available Reagent

Preparation  of  Field Stain :

Preparation of  Field stain A from reagents: 

  

1.     Methylene blue (analytical grade)                    - 1.6 grams.

2.   Azur                                                                     - 1 gram.

3.   Disodium dihydrogen phosphate anhydrous   - 10 grams.

4.   Potassium dihydrogen phosphate anhydrous - 12.5 grams.

5.   Distilled water                                                     - 1000 mL.

( सभी  को  Mix  करके  घोल  तैयार  करे  और   filter करके  बोतल  में  कार्क लगा कर रखे )

Preparation of Field stain B from reagents:

1.     Eosin(yellow water soluble) powder                -2.0 grams.

2.   Disodium dihydrogen phosphate anhydrous  - 10 grams.

3.   Potassium dihydrogen phosphate anhydrous - 12.5 grams.

4.   Distilled water                                                    - 1000 mL.

( सभी  को  Mix  करके  घोल  तैयार  करे  और   filter करके  बोतल  में  कर्क  लगा  कर  रखे )

Field Stain  ( Thin Smear):

Requirement:

1.     Field’s  stain  A & B.

2.   Methanol (absolute)  Or  Spray Fixative.

3.   Water

4.   Staining dishes

5.   Tissue Paper  Or Cotton

 

Procedure:

·        एक  clean  glass  slide  में  thin  blood  smear  बनाये  और  air  dry करे |

·        अब  Methanol  Staining  dishes  में  1 (One)  minute  डूबा कर  thin  blood  smear slide  को  Fix  करें | या  Spray Fixative  से  Fix कर लें |  

·        Microscopic slide को  tissue paper  से  और   हवा  में  सुखा  लें |

·        fixed smear  को  Field Stain B (Red Stain) Staining  dishes  में  5  to  6 seconds  तक  डूबाकर (Dip) रखें |

·        Wash in running tap water.

·        अब  Blood  smear  को  Field Stain A (Blue Stain) Staining  dishes  में  10  to  30 seconds  तक  डूबाकर (Dip) रखें |( Staining  time  may  be  adjusted)

·        Wash in running tap water.

·        Slide  के  पीछले  हिस्से  को  Tissue paper  or  cotton  से  साफ  करें  और  air dry करके  microscope  oil immersion lens  से  examine  करें |

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Field Stain  ( Thick Smear):

Requirement:

1.   Methanol (absolute)  Or  Spray Fixative -NO

2.   Field’s  stain  A & B.

3.   Water

4.   Staining dishes

5.   Tissue Paper  Or Cotton

 

Procedure:

·        एक  clean  glass  slide  में  thick  blood  smear  बनाये  और  air  dry करे |

·        अब  पहले  Blood  smear  को  Field Stain A (Blue Stain) Staining  dishes  में  3  to  5 seconds  तक  डूबाकर (Dip) रखें |

·        Wash immediately in running tap water.

·        अब  smear  को  Field Stain B (Red Stain) Staining  dishes  में  5  to  6 seconds  तक  डूबाकर (Dip) रखें |

·        Wash immediately in running tap water.

·        Slide  के  पीछले  हिस्से  को  Tissue paper  or  cotton  से  साफ  करें  और  air dry करके  microscope  oil immersion lens  से  examine  करें |

( Thick Blood Smear Slide  को  Haemolysed  किया  जाता  है  इस लिए  इसे Methanol से  fix  नहीं  करते  सीधे  Methylene blue में  पहले  डुबाना  न  भूले )

इस  प्रकार  से  आप  भी  Blood Smear slide   बना  कर  आवश्यकतानुसार  Field  Staining करके   microscope    से  देख  सकते  है |

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