TRBC Count कैसे करते है - (Bulk Dilution)

 TRBC Count - (Bulk Dilution)

Total RBC Count Total Red Blood Cell Count (RBC)  भी कहते हैं |

RBC Count की  इस technic  से सभी  clinical lab में RBC Test किया जाता है | इस  technic से बहुत से मरीजों  का  test के लिए sample  लेकर बाद में किया जा सकता है | 

TLC (total leukocytescount ) Test कैसे करते है

Requirements

1.Hb Pipette Or  Micro pipette

2.RBC Diluting Fluid -

       Trisodium citrate (3 %)  -   3.8 gm.

       Formalin  -   1 ml

       D/Water   - 99 ml.

3.Neubauer Counting Chamber & Cover Slip -  Neubauer Chamber में two platform होते है | दोनों platform में marking होता है व दोनों में counting कर सकते है | Cover slip  रखने  पर बीच में 0.7 mm गहरी जगह रहती है | Marking area 3 x 3 mm ( 9 Square mm ) व 9^th  large Quadrilateral area होते है चारों कोने वाले Quadrilateral area  में  single line रहता है चारों कोने वाले Quadrilateral area में 16^th  small Quadrilateral area  होते है | यह  WBC Counting Area  है  तथा बीच वाले Quadrilateral area में 400  small Quadrilateral area  होते है | चारों कोने वाले Quadrilateral and Square measure 1 Square mm होता है व प्रत्येक सबसे छोटे खाने (small area) 400 का Square measure 1/400 Square mm  होता है यह RBC Counting area  है

Counting के समय जो cells Quadrilateral area  की ऊपरी व left line को touch  करे उन्हें Square के अन्दर और  जो cells Quadrilateral area  की निचली व Right  line को touch  करे उन्हें Square के बाहर मानते हैं

4.EDTA Or Whole Blood

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5.Microscope

6.Tissue Paper

7.Dropper

Test विधि-

Clean & Dry Test Tube में micro pipette की सहायता से 3980 μl ( 3.98 ml ) RBC Diluting Fluid लें 

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• Hb Pipette में 20 mark (20μl Or 0.02 ml) तक सावधानी से EDTA blood Or Whole blood लें |

• Hb Pipette के बाहरी सतह पर लगा extra blood को tissue paper Or cotton से clean कर लें

• Hb Pipette में लिए गये Blood को Test tube के  RBC Diluting Fluid  में डाल कर Mix कर लें | | 15 मिनट wait  करे |

Clean & Dry Neubauer Counting Chamber & Cover Slip  ले 

• Cover Slip को Neubauer Counting Chamber में इस प्रकार रखे कि Neubauer  Chamber में अंकित चतुर्भुज इससे ढक जाय | अब Dropper Or  Pipette की सहायता से Dilution ले कर 45 degrees के Angle पर Chamber & Cover Slip के बीच रख कर Dilution को  Neubauer Chamber में  load करें ( याद रखे इस प्रक्रिया में air bubble न बने  व Counting area पूरा भर जाना चाहिए और Dilution chamber  से बाहर नहीं बहना चाहिए )|

• 15 मिनट Cells के set  होने तक स्थाई रखे | अब  Microscope  में  set  करके  High Power  Objective  में फोकस करके RBC Count करे | RBC Count में  बीच का चतुर्भुज प्रयोग किया जाता है | चार कोने वाले  और एक  बीच का कुल पांच  खाने याने कुल 80 सबसे छोटे खाने ,बेहतर result के लिए कम से कम 400 - 600 RBCs count करे | यदि  80 खाने में इतने RBCs  न  मिले तो अधिक खानों में गिने |

Calculation –

बीच के चतुर्भुज का कुल  क्षेत्रफल = 1 Square mm

सबसे छोटे चतुर्भुज का क्षेत्रफल  =  1/400 Square mm

depth  of chamber  = 1/10 mm

गणना क्षेत्र का आयतन = 1/4000 Cubic mm

कुल आयतन =     80/4000 Cubic mm  (1/50 Cubic mm )

Dilution  = 1:200

No. of cells count = N

Dilution  X   1 /आयतन   X   N

200  X  50  X  N

10,000  X  N /Cubic mm

Total RBC Count - normal range  4.7-6.0 mill/cu.mm

इस तरह से आप  TRBC test  कर सकते है |

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