Total Leukocytes Count (TLC) Test कैसे करते है - Bulk Dilution

Total WBC Count को  ही  Total Leukocytes Count (TLC)  भी कहते हैं |

CBC Test  क्या है | CBC क्यों करते है  

TLC Count - (Bulk Dilution)

TLC Count की  इस technic  से सभी  clinical lab में TLC Test किया जाता है | इस  technic से बहुत से मरीजों  का  test के लिए sample  लेकर बाद में किया जा सकता है |

 

TLC (total leukocytes count) Test कैसे करते है

Requirements

1.Hb Pipette

2.WBC Diluting Fluid -

 (4% acitic Acid + 2 Drop Genission violet/liter)

3.Neubauer Counting Chamber & Cover Slip -  Neubauer Chamber में two platform होते है | दोनों platform में marking होता है व दोनों में counting कर सकते है | Cover slip  रखने  पर बीच में 0.7 mm गहरी जगह रहती है | Marking area 3 x 3 mm ( 9 Square mm ) व 9^th  large Quadrilateral area होते है चारों कोने वाले Quadrilateral area  में  single line रहता है चारों कोने वाले Quadrilateral area में 16^th  small Quadrilateral area  होते है | यह  WBC Counting Area  है  तथा बीच वाले Quadrilateral area में 400  small Quadrilateral area  होते है | चारों कोने वाले Quadrilateral and Square measure 1 Square mm होता है व प्रत्येक सबसे छोटे खाने (small area) 400 का Square measure 1/400 Square mm  होता है यह RBC Counting area  है

Counting के समय जो cells Quadrilateral area  की ऊपरी व left line को touch  करे उन्हें Square के अन्दर और  जो cells Quadrilateral area  की निचली व Right  line को touch  करे उन्हें Square के बाहर मानते हैं

4.EDTA Or Whole Blood

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5.Microscope

6.Tissue Paper

7.Dropper

Test विधि-

Clean & Dry Test Tube में micro pipette की सहायता से 380 μl ( 0.38 ml ) WBC Diluting Fluid लें |

• Hb Pipette में 20 mark(20μl Or 0.02 ml) तक सावधानी से EDTA EDTAblood Or Whole blood लें |

• Hb Pipette के बाहरी सतह पर लगा extra blood को tissue paper Or cotton से clean कर लें

• Hb Pipette में लिए गये Blood को Test tube के  WBC Diluting Fluid  में डाल कर Mix कर लें | | 5 मिनट wait  करे |

Clean & Dry Neubauer Counting Chamber & Cover Slip  ले 

• 
  

• Cover Slinp को Neubauer Counting Chamber में इस प्रकार रखे कि Neubauer  Chamber में अंकित चतुर्भुज इससे ढक जाय |

• अब Dropper Or  Pipette की सहायता से Dilution ले कर 45 degrees के Angle पर Chamber & Cover Slip के बीच रख कर Dilution को  Neubauer Chamber में  load करें ( याद रखे इस प्रक्रिया में air bubble न बने  व Counting area पूरा भर जाना चाहिए और Dilution chamber  से बाहर नहीं बहना चाहिए )|

• 5 मिनट Cells के set  होने तक स्थाई रखे |

• अब  Microscope  में  set  करके  10x ( Low Objective) में फोकस करके WBC Count करे

Calculation –

चारों बड़े चतुर्भुजो का क्षेत्रफल = 1 Square mm  

depth  of chamber  = 0.9 mm

अब आयतन 0.1 Cubic mm हुआ |

Chamber की 4 चतुर्भुजों का आयतन = 0.1 X 4 = 0.4 Cubic mm

No. of cells count = N

0.4 Cubic mm में है   = N Cells

1 Cubic mm में है   = N  X Dilution /आयतन

               = N X  50  

Total WBC Count - normal range  4000-10500cells/cu.mm

इस तरह से आप  TLC test  कर सकते है |

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